血液腫瘤嵌合抗原受體自然殺傷細胞治療研究進展
近年來，細胞治療顯現出巨大的研究潛力和臨床價值。嵌合抗原受體T細胞（CAR-T細胞）治療在血液腫瘤領域已取得重大進展，CD19 CAR-T治療B-ALL完全緩解率高達90％。但CAR-T治療仍面臨諸多挑戰：①自體T細胞質量不足，異體T細胞引起移植物抗宿主病（GVHD）風險；②製備耗時；③細胞因數釋放綜合征（CRS）和免疫效應細胞相關神經毒性綜合征（ICANS）等不良反應；④復發；⑤價格高昂。CAR-自然殺傷（NK）細胞可以在一定程度上彌補CAR-T治療的局限，是最具潛力的新一代CAR細胞治療產品。2020年一項靶向CD19 CAR-NK治療B系腫瘤的臨床研究實現了73％的緩解率和64％的完全緩解率，並且無GVHD、CRS和ICANS發生，首次確定CAR-NK臨床應用的有效性和安全性。本文我們主要對NK細胞生物學特點、CAR-NK作用機制、CAR-NK與CAR-T的比較、血液腫瘤CAR-NK研究現狀、目前的優化措施進行了總結歸納。
一、NK細胞生物學特點
NK細胞屬於大顆粒淋巴細胞，在外周血中占10％～15％，是天然免疫反應的關鍵組分。作為第一道免疫防線，NK細胞可以自發殺傷腫瘤細胞而不需抗原提呈。NK細胞表面有大量的啟動型受體（NKG2D、NKp46、NKp44、NKp30、CD16、2B4、DNAM1等）和抑制性受體（NKG2A、KIRs、TIGIT、CD96、LAG3、TIM3、PD1、KLRG1、CD161等），對靶細胞的耐受或殺傷取決於這兩類受體信號輸入的動態平衡。NK細胞啟動後脫顆粒，釋放多種細胞毒性物質（顆粒酶B、穿孔素、粒溶素），導致靶細胞裂解。
NK細胞表面的CD16（FcγR Ⅲ）受體可以識別結合在靶細胞表面的抗體Fc段，通過抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用（ADCC）以顆粒酶B依賴性機制發揮裂解靶細胞的功能。表面的Fas配體和腫瘤壞死因數相關凋亡誘導配體（TRAIL）可以分別和腫瘤細胞表面的Fas和TRAIL受體結合，誘導靶細胞內凋亡相關蛋白酶的活化，觸發靶細胞內死亡受體依賴性凋亡機制。啟動的NK細胞可以分泌多種趨化因數招募T細胞、單核細胞和中性粒細胞，分泌IFN-γ、TNF-α、GM-CSF和IL-10等細胞因數調節樹突狀細胞、巨噬細胞和T細胞，從而調動更多的免疫細胞參與抗腫瘤免疫反應。
二、CAR-NK作用機制
CAR結構是基於T細胞或NK細胞活化所依賴的信號設計的，包活啟動受體信號（信號1）、共刺激信號（信號2）和細胞因數信號（信號3）。CAR-NK細胞的CAR結構包含胞外段、跨膜段和胞內段，早期CAR-NK設計延用CAR-T細胞中的CAR結構。CAR-NK胞外段主要是抗體單鏈可變區。CAR-NK常用的跨膜段是由CD3ζ、CD8或CD28改造而來，其中T細胞特異性的CD8和CD28最常用。胞內段負責CAR-NK接收到靶抗原信號後的細胞啟動，是信號傳導下游所招募的共刺激分子和信號結構域的線性結構。目前CAR-NK中涉及的共刺激分子主要包括免疫球蛋白超家族成員（CD28），TNF受體超家族成員（4-1BB、CD27和OX40）, 信號通路淋巴細胞活化分子相關受體家族（2B4）。胞內段不同分子構成是區分目前四代CAR的主要分類依據。第一代CAR只包含CD3ζ，第二代和第三代則在第一代基礎上分別添加一個或兩個共刺激結構域，第四代則在第三代基礎上增加了細胞因數分泌段，以維持CAR細胞的細胞毒性和持久性。目前CAR-NK領域最常用的為CD28-CD3ζ和41BB-CD3ζ兩種二代CAR結構；而在第三代中，CD28-41BB-CD3ζ最常用。另外，回輸CAR-NK細胞的KIR與受者KIR配體不匹配可通過“迷失自我”機制增強NK細胞內在的非CAR依賴性抗腫瘤活性。
三、CAR-NK與CAR-T治療的比較
相比較而言，CAR-NK不僅可以彌補前述CAR-T的不足，而且顯示出額外的優勢（表1）。對於異體來源的細胞，異體CAR-T即使在相合情況下也有免疫排斥的風險，異體CAR-NK即使低HLA相合度（1/6）條件下也未觀察到GVHD事件。另外，KIR配體與受體的不匹配更能啟動NK細胞天然殺傷毒性。腫瘤細胞可以通過下調主要組織相容性複合物（MHC）Ⅰ類分子逃避T細胞的識別殺傷，但是基於“迷失自我”機制NK細胞可以識別殺傷這些細胞。另外，CAR-NK聯合單克隆抗體可以通過ADCC增強腫瘤清除效果，治療策略具有多樣性。在安全性方面，CAR-T細胞發揮效應過程中產生的INF-γ、TGF-α、IL-1和IL-6因數等可以引發CRS和ICANS。然而，NK細胞主要分泌IL-3和GM-CSF，引起CRS和ICANS風險極低，並且在臨床試驗（NCT03056339）中未觀察到相應不良事件。同時，由於腫瘤微環境中PD-1的表達，CAR-T細胞的功能受到抑制，而NK細胞受影響較小。CAR-NK細胞將保留其固有的通過啟動性受體識別和靶向腫瘤細胞的能力，使腫瘤細胞通過下調CAR靶抗原導致復發的可能性低於CAR-T細胞。多來源、多殺傷途徑以及低惡性不良反應風險使CAR-NK細胞更有潛力成為通用型產品（表2）。在血液腫瘤和實體瘤臨床前實驗中，CAR-NK在和CAR-T的對比殺傷中呈現早期快速高效殺傷和低毒性的特點。雖然可獲得的CAR-NK臨床資料有限，但是大量的臨床前研究所顯示的CAR-NK的腫瘤控制能力，展示了其未來應用於臨床的美好前景。
表1
CAR-T與CAR-NK細胞的特徵比較
| 細胞類型 | 來源 | 製備 | 殺傷毒性 | 不良反應 | 微環境抑制 | 復發 |
| CAR-T | 自體（患者T細胞的數量和品質問題）；異體（GVHD風險） | 個體化的T細胞採集和製備耗時 | CAR依賴性細胞毒性 | CRS和ICANS發生率高，嚴重的不良反應可導致患者死亡 | 免疫檢查點表達水準較高 | 多種復發機制 |
| CAR-NK | 異體原代NK細胞（外周血、臍血、幹細胞）；自體原代NK細胞；NK細胞系（NK-92細胞系） | 通用型，現貨 | CAR依賴性和非CAR依賴性細胞毒性 | CRS和ICANS發生率低 | 免疫檢查點表達水準較低 | 復發可能性相對較小 |
注 CAR-T：嵌合抗原受體T細胞；CAR-NK：嵌合抗原受體自然殺傷細胞；GVHD：移植物抗宿主病；CRS：細胞因數釋放綜合征；ICANS：免疫效應細胞相關神經毒性綜合征
表2
嵌合抗原受體自然殺傷細胞（CAR-NK）來源
| 細胞來源 | 獲得性 | 功能表型 | 製備過程 | 細胞產品屬性 |
| PB-NK | 需要供者或自體NK細胞，占外周淋巴細胞的10%~15% | 成熟表型 | NK細胞分選，CAR表達載體轉染/轉導，擴增 | 異質性產品 |
| CB-NK | 來自全球臍血庫，數量極少，占CB淋巴細胞的15%~30% | 抑制性受體NKG2A表達水準高，對K562細胞殺傷毒性弱 | 異質性產品 | |
| iPSC-NK | 增殖能力高 | 不成熟表型，低CD16表達 | 分化，轉染/轉導和擴增；或轉染/轉導、分化和擴增 | 同質性產品 |
| NK-92 a | NK淋巴瘤細胞系，增殖能力高 | 缺乏CD16表達 | 轉染/轉導，擴增，輻射 | 同質性產品 |
注 PB-NK：外周血來源的NK細胞；CB-NK：臍血來源的NK細胞；iPSC-NK：誘導多能幹細胞來源的NK細胞。a NK-92細胞系，該細胞系製備和編輯容易，對凍融迴圈的敏感性低，臨床輸注前需輻照
四、血液腫瘤領域CAR-NK研究現狀
截至2021年11月，在血液腫瘤領域的臨床前研究有50多篇，Clinicaltrials註冊的CAR-NK臨床試驗有20項，具體見表3。
表3
2021年11月Clinicaltrials註冊的嵌合抗原受體自然殺傷細胞（CAR-NK）臨床研究
| 疾病 | 靶點 | NK細胞來源 | CAR結構（包括細胞因數） | 劑量 | 預處理方案 | 治療方案 | 期 | NCT號 | 狀態 |
| 難治/復發B系腫瘤 | CD19 | – | OX40-CD3ζ；mIL-15 | 3×108（<50 kg者2×106/kg），d 0、7、14，28 d為1週期 | – | 單藥 | 1期 | NCT05020678 | 招募 |
| B系腫瘤 | CD19 | CB-NK | –；自分泌IL-15 | 1×105/kg、1×106/kg、1×107/kg（±20%） | 氟達拉濱、環磷醯胺 | 單藥 | 1期 | NCT04796675 | 招募 |
| B系腫瘤 | CD19 | CB-NK | CD28-CD3ζ；自分泌IL-15 | 1×105/kg、1×106/kg、1×107/kg | 氟達拉濱、環磷醯胺、美司鈉 | 單藥 | 1/2期 | NCT03056339 | 招募 |
| B系腫瘤 | CD19 | – | CD28-4-1BB-CD3ζ | – | – | 移植前的橋接治療 | 1/2期 | NCT02892695 | 未知 |
| 難治/復發B系淋巴瘤 | CD19/22 | – | – | （0.5~6）×105/kg | – | 單藥 | 1期（早） | NCT03824964 | 未知 |
| 難治/復發B系淋巴瘤和CLL | CD19 | iPSC-NK | NKG2D-2B4-CD3ζ；IL-15RF | – | 氟達拉濱、環磷醯胺 | 單藥或聯合利妥昔單抗 | 1期 | NCT04245722 | 招募 |
| 難治B系淋巴瘤 | CD22 | – | – | （0.5~6）×105/kg | – | 單藥 | 1期（早） | NCT03692767 | 未招募 |
| 難治B系淋巴瘤 | CD19 | – | – | （0.5~6）×105/kg | – | 單藥 | 1期（早） | NCT03690310 | 未招募 |
| 難治B系淋巴瘤 | CD19 | – | – | – | – | 單藥 | 1期（早） | NCT03824951 | 未知 |
| B系淋巴瘤 | CD19 | CB-NK | CD28-CD3ζ；自分泌IL-15 | – | 卡莫司汀、阿糖孢苷、依託泊苷、馬法蘭、利妥昔單抗（移植前的化療方案） | 聯合大劑量化療和自體移植 | 1/2期 | NCT03579927 | 撤銷 |
| 自體移植後的NHL | CD19 | iPSC-NK | NKG2D-2B4-CD3ζ；IL-15RF | 9×107、3×108、9×108 | – | 聯合利妥昔單抗 | 1期 | NCT04555811 | 招募 |
| NHL | CD19 | – | – | 2×106/kg、6×106/kg、2×107/kg | 氟達拉濱、環磷醯胺 | 單藥 | 1期（早） | NCT04639739 | 未招募 |
| NHL | CD19 | – | – | – | – | 單藥 | 1期 | NCT04887012 | 招募 |
| 難治/復發ALL | CD19 | PB-NK | 4-1BB-CD3ζ | – | – | 單藥 | 1期 | NCT00995137 | 完成 |
| MM | BCMA | CB-NK | – | （1~3）×106/kg、（3~6）×106/kg、（0.6~1.2）×107/kg | 氟達拉濱、環磷醯胺 | 單藥 | 1期（早） | NCT05008536 | 未招募 |
| MM | BCMA | NK-92 | – | – | – | 單藥 | 1/2期 | NCT03940833 | 招募 |
| 難治/復發AML | CD33 | NK-92 | CD28-CD137-CD3ζ | – | – | 單藥 | 1/2期 | NCT02944162 | 完成 |
| AML | CD33 | – | – | （1~3）×106/kg、（3~6）×106/kg、（0.6~1.2）×107/kg | 氟達拉濱、環磷醯胺 | 單藥 | 1期 | NCT05008575 | 未招募 |
| AML、MDS | NKG2D | – | OX40-CD3ζ；mIL-15 | 方案A：1×108（< 50 kg者2×106/kg），d 0、7、14，28 d為1週期；方案B：1.5×108（< 50 kg者3×106/kg），d 0、7，28 d為1週期 | 氟達拉濱、環磷醯胺 | 單藥 | 1期 | NCT04623944 | 招募 |
| CD7+白血病和淋巴瘤 | CD7 | – | CD28-4-1BB-CD3ζ | – | – | 單藥 | 1/2期 | NCT02742727 | 未知 |
注 CLL：慢性淋巴細胞白血病；NHL：非霍奇金淋巴瘤；ALL：急性淋巴細胞白血病；MM：多發性骨髓瘤；AML：急性髓系白血病；MDS：骨髓增生異常綜合征；PB-NK：外周血來源的NK細胞；CB-NK：臍血來源NK細胞；iPSC-NK：誘導多能幹細胞來源NK細胞；NK-92：NK-92細胞系；mIL-15：膜表達IL-15；IL-15RF：IL-15/IL-15Rα融合蛋白；–：未提及
- B系淋巴瘤和白血病：基於CAR-T在B系腫瘤中的成功應用，CAR-NK在B系淋巴瘤和白血病中同樣取得矚目的成績。靶向CD19的CAR-NK治療B系腫瘤的臨床研究結果顯示CAR-NK細胞治療在患者中實現了73％的緩解率和64％的完全緩解率。首次確定CAR-NK臨床應用的可行性和有效性。現有的臨床前和臨床研究靶點主要有CD19、CD20、CD22、EBNA、WT-1和CD19/CD22雙靶。在目前註冊的CAR-NK臨床試驗中，針對B系腫瘤的占絕大多數。雙靶CAR-NK的研究也率先在B系腫瘤中開展。
- 多發性骨髓瘤（MM）：在MM領域，CAR-NK研究的靶點主要有BCMA、CS1（SLAMF7）、CD138、CD19和NKG2DL。CD138 CAR-NK-92MI和CS1 CAR-NK92都呈現出良好的腫瘤控制能力並延長MM異種移植小鼠生存期。除了NK細胞系的應用，自體CAR-NK也顯示出優越的效果。從MM患者體內分離出啟動和擴增的NK細胞，並針對MM細胞表面高表達的NKG2DL（MICA、MICA/B、ULBP-1、ULBP-2、ULBP-3等）製備NKG2D CAR-NK細胞，顯示出高效的腫瘤清除率，且對正常細胞毒性低，小鼠體內也未觀察到GVHD和治療相關毒性。
- T系腫瘤：在T系腫瘤領域，目前CAR-NK的研究靶點有CD3、CD4、CD5和CD7。Chen等給予3次CD3 CAR-NK92治療顯著改善了Jurkat細胞種植小鼠的生存情況，並且兩周內瘤負荷降低87％。CD4為成熟T細胞的標誌，CD4 CAR-NK在有效殺傷腫瘤細胞的情況下不影響造血幹細胞和早期祖細胞的功能，展示出較高的安全性，並且2次CAR-NK92輸注延長了小鼠生存時間。CAR-NK最早在T系腫瘤中應用的多次輸注模式為後續CAR-NK的臨床應用提供了新的思路。由於目前的T系靶點缺乏腫瘤特異性，往往引起T細胞再生障礙。基於CAR-NK治療的安全性，研究者提出在CD3 CAR-NK治療前/中/後聯合移植降低腫瘤負荷，同時通過清除供者來源T細胞避免CVHD，通過清除宿主T細胞避免急性器官排斥反應。
- 急性髓系白血病（AML）：CAR-NK在AML領域目前的研究靶點主要有CD4、CD7、CD33、CD38、CD123、FLT3和NKG2D，由於目前的靶點在髓系細胞或其他系細胞上廣譜表達，細胞治療在AML上應用有限，更特異性的靶點目前正在探索中。CD70 KO CD70 CAR-NK和CLL-1 CAR-NK聯合CISH敲除的臨床前資料顯示靶向治療AML有一定潛力。新一代的FLT OR CD33 NOT MECN 邏輯門CAR-NK細胞研究（SENTI-202）顯示，一方面啟動性CAR可以識別FLT3或CD33，優於傳統的單靶FLT3或CD33 CAR-NK，另一方面抑制性CAR可以保護高達67％的FLT3陽性正常細胞免受啟動性CAR所介導的細胞毒性。邏輯門CAR-NK的應用在治療AML上有較大的探索空間。
五、提高CAR-NK治療的有效性
隨著CAR-NK研究的深入，研究者們採取一系列優化措施來提高CAR-NK的有效性。
（一）優化CAR結構
- NK特異性CAR結構：NK細胞特異性的典型分子NKG2D、2B4和DNAM1被用來探索更優化的跨膜段，CD107a脫顆粒效應和細胞毒性更強。另外，跨膜段設計應遵循NK細胞上跨膜蛋白的自然方向（N→C端），天然NKG2D分子具有C→N端跨膜區域，且具有短的細胞質尾，直接應用效果受限，而逆轉NKG2D 跨膜段為N→C端可能增強CAR效應。
研究者對CAR-NK的CAR胞內段也進行了更深入的探索。在靶向CD5的CAR-NK治療T系腫瘤的臨床前實驗中，2B4ζ-CAR-NK相比於41BBζ-CAR-NK有更高水準的啟動受體（CD69、NKG2D、HLA-DR）表達和更高水準的細胞因數（IFN-γ和TNF-α）分泌。信號結構域除了CD3ζ，NK特異性的DAP10、DAP12也被用來進行了優化CAR結構設計的探索，但是效果欠佳。DAP12.CAR與CD3ζ.CAR的殺傷毒性無顯著差異，但是CD3ζ.CAR細胞有更慢的CAR表達下調速度和較強的脫顆粒能力。而在NKG2D-2B4ζ結構基礎上再添加DAP10或DAP12也並沒有對CAR-NK細胞功能引起差異性改變。
而對於整個CAR結構，NK特異性跨膜段和共刺激分子組合NKG2D-2B4ζ，相較於T細胞特異性CAR CD28-41BBζ，誘導CAR-NK的CD107a表達和IFN-γ分泌水準更高，並介導細胞內下游磷酸化分子水準升高提前。因此，NK細胞特異性結構域參與的不同排列組合在探索更優CAR結構中將有更大的潛能。
- 雙靶CAR結構：單靶CAR細胞可能由於靶抗原下調或陰性而導致腫瘤細胞逃逸，而表達雙CAR的細胞可以提高CAR細胞的識別和靶向攻擊效率。同時表達並聯雙靶CD19/CD22的CAR-NK細胞可以高效殺傷CD19單表達和CD22單表達的RS4;11細胞，從而避免因一種抗原丟失導致的CAR-NK失效[12]。
（二）增強細胞毒性
- 誘導型MyD88/CD40共刺激分子（iMC）：iMC是一種核糖核酸調節的蛋白開關，在CAR-T中可以作為細胞啟動劑促進CAR-T細胞增殖和改善持久性，應用到CAR-NK細胞中，研究者發現iMC啟動的CAR-NK顯示出細胞因數和趨化因數分泌增加，穿孔素和顆粒酶B脫顆粒水準提高，進而增強抗腫瘤細胞毒性。
- 記憶NK分化：IL-12、IL-15和IL-18預處理NK細胞可以誘導記憶表型，即細胞因數誘導的記憶樣NK（ML NK）細胞。ML NK呈現出糖酵解代謝譜，啟動受體表達增加，並且不受KIR-KIRL相互作用的干擾，在NSG異種移植小鼠模型體內顯示出更長的存活時間，並顯著改善了針對一系列靶點的效應功能。ML NK分化表型和CAR工程化協同增強NK細胞對耐藥的白血病/淋巴瘤的反應性，並且體內實驗顯示19-CAR-ML NK可以降低人源化小鼠的瘤負荷並改善小鼠生存。
- 增強ADCC作用：NK-92細胞系不表達CD16分子，通過修飾編輯使其表達IgG Fc受體的高親和力變異體（FcγRⅢ）同時聯合利妥昔單抗可以增強ADCC作用。同時表達高親和力非裂解性CD16的CAR-iPSC-NK（FT596）聯合利妥昔單抗目前也已用於臨床試驗中（NCT04245722）。
（三）延長持久性
- IL-15：IL-15在NK的生存、發展、啟動、代謝改變方面發揮重要作用，與CAR-NK細胞在體內的存續性密切相關。目前的CAR-NK產品多為自分泌IL-15，自分泌模式可以使CAR-NK持續處於高濃度IL-15微環境中，延長CAR-NK細胞的體記憶體續時間長達12個月。另外，膜表達IL-15（mIL-15）配體可以通過細胞間交互介導的反式信號傳遞模式來傳遞更強的IL-15刺激信號，並應用於臨床試驗中（NCT04623944）。表達mIL-15/IL-15Rα融合蛋白的CAR-NK（FT596）產品目前也應用於治療B系血液腫瘤的臨床試驗（NCT04555811和NCT04245722）。細胞因數誘導型含SH2蛋白（CIS）是IL-15信號的關鍵的負性調節因數，CRISPR/Cas9基因編輯敲除CISH基因的CAR-NK細胞通過增強Akt/mTORC1軸和c-MYC信號，提高有氧糖酵解水準，進而增強CAR-NK細胞效應功能[27]。
- 多次輸注：基於目前的臨床和臨床前資料來看，CAR-NK在體內的擴增和持續有限，單次輸注雖然有很強的腫瘤殺傷效果，但是可能不能完全清除腫瘤細胞，因此連續重複輸注大劑量CAR-NK細胞以維持體內CAR-NK動力學穩定和持久可能是未來CAR-NK治療的策略[28]。
（四）減少耗竭信號
NK細胞受免疫檢查點的影響相對T細胞較小，但是其在NK細胞耗竭過程中仍發揮著重要作用。PD-1在活化和更具反應性表型的NK細胞上的表達更為豐富。PD-L1阻斷劑可以提高NK細胞的體內持久性和保留其細胞毒性，同時提高體內NK細胞通過ADCC的抗腫瘤效應[29]。另外，抗PD-L1抗體作為PD-L1+NK細胞的功能性啟動抗原，通過p38信號通路提高NK細胞對白血病細胞的殺傷毒性[30]。TIGIT是表達在T細胞和NK細胞上的與耗竭相關的免疫檢查點，高表達TIGIT的NK細胞伴隨著CD107a、IFN-γ和TNF-α等活化因數的分泌減少，並與疾病進展和免疫逃逸相關[31]。研究顯示離體的NK細胞IL-15活化後伴隨有TIGIT表達上調，聯合抗TIGIT抗體顯著提高NK的腫瘤殺傷毒性[32]。阻斷TIGIT可以延緩NK細胞耗竭，並在多種小鼠荷瘤模型中促進了NK細胞依賴性腫瘤免疫，並以NK依賴性方式促進了腫瘤特異性T細胞免疫[33]。
目前，血液腫瘤領域尚無CAR-NK聯用免疫檢查點阻斷的應用，在實體瘤領域，靶向PD-L1的CAR-NK細胞（PD-L1 CAR t-haNK細胞）聯合使用抗PD-1抗體和N803呈現出良好的腫瘤控制效果（NCT04847466）[34]。CAR-NK聯合免疫檢查點阻斷的應用尚待進一步探索。
（五）避免自絞殺
CD38是MM已確立的免疫治療靶點，而其是否可以作為AML的治療靶點尚待探索。但是由於CD38在NK細胞上的基礎資料表達以及離體培養過程中進一步誘導上調成為設計靶向CD38的CAR-NK的障礙。通過敲除NK細胞的CD38製備的CD38 KO CD38 CAR-NK顯示出自絞殺減低和靶向攻擊AML原代細胞的能力增強的現象[35]。
（六）改善趨化性
CAR-NK可以趨向於腫瘤病變部位。回輸到淋巴瘤患者體內的CAR-NK淋巴結部位數目顯著高於骨髓和外周血[2]。然而，體外培養的NK細胞會下調CXCR4、上調CXCR3表達，導致NK細胞骨髓歸巢能力下降，而趨向於炎症部位，使NK細胞滯留在髓外組織[36]。共表達CXCR4的CAR-NK向骨髓巢的遷移能力增強，並顯著降低MM移植小鼠模型股骨區域的瘤負荷[21]。
六、CAR-NK治療的安全性
NK細胞表面抑制性受體識別正常細胞表面的MHC Ⅰ類分子通過“耐受”機制來抑制對正常細胞的毒性。異體輸注時也不會介導GVHD的發生。對於工程化的CAR-NK，為了避免和抵消增強療效相關措施帶來的毒性風險，相關“自殺”開關也同時被設計於CAR-NK中。通過加入一個正交調節的促凋亡開關，即雷帕黴素誘導的Caspase-9（iRC9），iRC9二聚化促進CAR-NK細胞凋亡，表現為雷帕黴素呈劑量依賴性的誘導細胞表面Annexin Ⅴ表達[22]。在已發表的臨床試驗中，CAR-NK顯示出較高的安全性，低GVHD、CRS和ICANS風險，研究者並沒有啟動iCR9開關[2]。
七、結語
CAR-NK在療效方面顯示出巨大的潛能，在安全性方面顯示出巨大的優越性。但是CAR-NK也存在大規模製備方法改進、凍存措施優化和療效增強的需求，同時體記憶體續時間短、耗竭問題尚待解決。總體來說，CAR-NK在未來更有可能成為通用型細胞產品，在單藥或者聯合移植、單抗等治療方面有較大的優勢。CAR-NK研究開創了細胞治療的新思路，相信在不久的將來隨著CAR-NK細胞治療技術的成熟將給更多腫瘤患者帶來福音，使人類向攻克難治復發性腫瘤治療的難題更進一步。
Zhonghua Xue Ye Xue Za Zhi. 2022 Dec; 43(12): 1051–1056.
Chinese. doi: 10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2022.12.015